隨著血細胞分析儀越來越多的選擇，同一實驗室可能存在不同品牌的血細胞分析儀，由于各廠家采用的技術(shù)及標準均有一定的差異，因此為保證實驗內(nèi)部不同品牌的血細胞分析儀具有統(tǒng)一性，建立一套完善的校準與室內(nèi)質(zhì)控系統(tǒng)是一個重要的手段。
1.材料與方法
1．1 儀器和試劑 ①美國貝克曼庫爾特LH750全自動血細胞分析儀及配套試劑；② 美國雅培CD1700全自動血細胞分析儀及配套試劑；③ 美國貝克曼庫爾特公司的S—Cal校準品及定值質(zhì)控品。
1．2 新鮮全血校準品取同血型的常規(guī)體檢的健康人的混合新鮮全血14毫升(EDTA-K 抗凝)，先在顯微鏡下觀察細胞均散在分布，在貝克曼庫爾特LH750全自動血細胞分析儀上檢測無任何警示，且結(jié)果均在正常人的結(jié)果范圍之內(nèi)。然后將其分裝至三個無抗凝劑的試管中，其中第一管8毫升，其它兩管各3毫升。在2小時內(nèi)檢測完畢。
1．3 儀器準備
1．3．1 美國貝克曼庫爾特公司工程師對LH750全自動血細胞分析儀進行全面保養(yǎng)及校準，校準后各參數(shù)CV值及定值質(zhì)控均在允許范圍之內(nèi)，實驗在校準當天進行。
1．3．2 美國雅培公司工程師對CD1700全自動血細胞分析儀進行全面保養(yǎng)，各參數(shù)CV值均在允許范圍之內(nèi)，實驗在校準后第52天進行，進行前對儀器進行常規(guī)保養(yǎng)。
1．4 校準質(zhì)控判定標準
1．4．1 校準判斷標準：根據(jù)中華醫(yī)學會檢驗分會關(guān)于血液分析儀校準規(guī)范化的建議要求來判斷(見表1)，各項目參數(shù)均值與定值的差異全部等于或小于表中的第一列數(shù)值時，儀器不需進行調(diào)整，記錄檢測數(shù)據(jù)即可；若各參數(shù)均值與定值的差異大于表中的第二列數(shù)值時，不要對儀器進行調(diào)整，需請維修人員核查原因并進行處理；若各參數(shù)均值與定值的差異在表中第一列與第二列數(shù)值之間時，需對儀器進行調(diào)整 。sloidwr
1．4．2 失控判斷標準：以1988年美國臨床實驗室改進修正案(CLIA’88)允許誤差范圍的1／4來確認兩臺細胞分析儀的精密度及偏差室內(nèi)質(zhì)控。CLIA’88允許誤差范圍：白細胞(WBC)為15%，紅細胞(RBC)為6% ，血紅蛋白(HGB)為7%，血小板(PLT)為25%，平均紅細胞體積(MCV)為6％。
1．5 溯源目標系統(tǒng)確定 以貝克曼庫爾特LH750全自動血細胞分析儀為參考儀器(此儀器參加廣東省室間質(zhì)評評比為優(yōu)秀，且每年參加貝克曼庫爾特全球質(zhì)控，可溯源至國際標準參考方法)。
1．6 操作步驟 ① 取第1管，在LH750血細胞分析儀上嚴格按儀器操作規(guī)程連續(xù)檢測l1次，計算第2～l1次檢測結(jié)果的均值(x靶1)、標準差(s1)及變異系數(shù)(CV1)，以此均值為混合新鮮全血的定值(x1)。② 取第2管，在CD1700血細胞分析儀上嚴格按儀器操作規(guī)程連續(xù)檢測l1次，計算第2～11次檢測結(jié)果的均值(x靶2)、標準差(s2)及變異系數(shù)(CV2)。③ 根據(jù)公式 ，計算出WBC，RBC，HGB，PLT及MCV的偏差，以這些參數(shù)的偏差和CLIA’8允許誤差的1／4比較，決定是否需要對CD1700血細胞分析儀某參數(shù)進行調(diào)整[ ]。④調(diào)整后，取第3管，在CD1700血細胞分析儀上嚴格按儀器操作規(guī)程連續(xù)檢測l1次，計算第2～l1次檢測結(jié)果的均值(x3)再計算偏差，觀察偏差是否在CLIA’88允許誤差的1／4范圍內(nèi)，如不在此范圍，再繼續(xù)調(diào)整。⑤ 以校準的偏差作為CD1700比對室內(nèi)質(zhì)控的靶值，以CLIA’88允許范圍的1／4作為CV值，每日選擇一個正常標本進行比對試驗，按以上方法進行計算出偏差，并以此偏差進行比對室內(nèi)質(zhì)控圖繪制，觀察CD1700每日是否存在偶然誤差或系統(tǒng)誤差，如存在系統(tǒng)誤差應(yīng)重新進行以上比對試驗，如存在偶然誤差應(yīng)及時查找原因，并進行必要處理。
2.結(jié)果
2．1 貝克曼庫爾特LH750血細胞分析儀校準后精密度、準確度均在廠家允許范圍之內(nèi)，結(jié)果見表2。
2．2 兩臺血細胞分析儀各參數(shù)均值經(jīng)公式計算出偏差，我們發(fā)現(xiàn)HGB，PLT偏差小于中華醫(yī)學會檢驗分會校準判斷標準表中的第一列數(shù)值，WBC，RBC和MCV均在表中第一列與第二列數(shù)值之間時，因此需對WBC，RBC和MCV進行校準，經(jīng)校準后CD1700的WBC，RBC和MCV偏差均小于表中的第一列數(shù)值，結(jié)果見表3(各項目單位同表2)。
2．3 當月CD1700各參數(shù)比對室內(nèi)質(zhì)控的平均值與靶值較接近，變異系數(shù)均在CLIA’88允許誤差的1／4范圍之內(nèi)，比對室內(nèi)質(zhì)控統(tǒng)計見表4(各項目單位同表2)。
3.討論
血細胞分析儀的廣泛應(yīng)用顯著地提高了血細胞及相關(guān)參數(shù)檢測的精密度，由于不同的血細胞分析儀生產(chǎn)廠家各自使用的測定原理和方法不盡相同，使得測定結(jié)果及參考范圍有所差異；同時，在國內(nèi)、外眾多的大、中型醫(yī)院中，同一實驗室擁有不同品牌、不同型號的血細胞分析儀已成為較普遍的現(xiàn)象，致使在同一實驗室內(nèi)同一標本在不同儀器上分析，可能出現(xiàn)測定值的偏差，給評估和解釋結(jié)果以及給臨床上依賴的實驗室數(shù)據(jù)動態(tài)監(jiān)測帶來困難。因此有賴其校準的溯源體系的建立，保證校準品的定值溯源至參考方法，既可使檢測結(jié)果準確，又可使不同檢測原理的分析儀在不同時間、地點得出的檢測結(jié)果具有可比性。ICSH 推薦參考方法為溯源鏈最高等級的參考檢測方法，貝克曼庫爾特使用參考方法對其校準實驗室的校準品(新鮮全血)進行定值，定值后的校準品對其選擇的系統(tǒng)進行校準，校準后的檢測系統(tǒng)再對廠家的產(chǎn)品校準品進行定值，定值后的工作校準品再校準廠家的終端用戶儀器，校準后的儀器再繼續(xù)對新鮮全血定值，定值的新鮮全血再對其它型號的血細胞自動分析儀進行校準。這樣，被校準的兩種血細胞自動分析儀均具有同一溯源性。
新鮮全血是最佳的比對試驗標本及校準物，確立實驗室內(nèi)的標準參比儀器，再建立新鮮全血在多臺儀器問的比對及校準體系在擁有多臺不同品牌、不同型號的血細胞分析儀的大、中型醫(yī)院實驗室，不失為一種簡便、經(jīng)濟的措施，每日進行比對室內(nèi)質(zhì)控并進行總結(jié)分析便于發(fā)現(xiàn)兩臺血細胞分析儀的偶然誤差、系統(tǒng)誤差，通過總結(jié)分析可評價儀器狀態(tài)及或系統(tǒng)傾向，通過校準可使結(jié)果達到統(tǒng)。因此，通過本實驗室的實踐，我們認為此系統(tǒng)的建立和實施方案是行之有效的。
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